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Uma das principais finalidades dos resultados dos exames laboratoriais é esclarecer as dúvidas oriundas durante a anamnese e exame físico que surgem a partir do raciocínio clínico do médico veterinário.
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Para que o laboratório clínico possa atender adequadamente a este propósito é indispensável que o preparo do paciente, a coleta, o transporte e a manipulação dos materiais a serem avaliados obedeçam a determinadas regras.
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Após a coleta de sangue para a realização de exames laboratoriais, é importante conhecer, controlar e, se possível, evitar algumas variáveis que possam interferir com a exatidão dos resultados.
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COMPOSIÇÃO DO SANGUE
O soro é obtido através da centrifugação do sangue coletado em tubo com ativador de coágulo (tubo vermelho) e corresponde à sua fração líquida que resta após a coagulação, em que ocorre a transformação de fibrinogênio em fibrina. Devido à formação do coágulo, o soro não contém os fatores de coagulação e fibrinogênio, apenas albumina e globulinas.
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O plasma é obtido através da centrifugação do sangue coletado em tubo com anticoagulante, como EDTA (tubo roxo), citrato de sódio (tubo azul) e heparina (tubo verde). Corresponde, portanto, à parte líquida do sangue não coagulado; e contém fibrinogênio, albumina, globulinas e fatores de coagulação, sendo responsável pelo transporte das células, nutrientes, anticorpos, entre outras substâncias fundamentais.
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Após a coleta do sangue, o que determina a diferenciação entre plasma e soro é a presença ou não de anticoagulante. Sendo assim, plasma é a parte líquida de um sangue com presença de anticoagulante e soro é a parte líquida de um sangue sem anticoagulante.
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Para a realização de exames bioquímicos, sorológicos, hormonais, entre outros, utilizamos na maioria das vezes soro para a análise, pois há menos interferência de substâncias.
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HEMÓLISE
É a liberação dos constituintes intracelulares para o plasma ou soro após a ruptura das hemácias e é reconhecida pela aparência avermelhada destes após a centrifugação ou sedimentação da amostra.
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Pode ser causada pela hemoglobina liberada em rupturas dos eritrócitos ou pela lise de plaquetas e granulócitos; que pode ocorrer, por exemplo, quando o sangue é armazenado em baixa temperatura, mas não o suficiente para congelar.
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CUIDADOS PÓS COLETA
Homogeneizar a amostra suavemente por inversão de 5 a 10 vezes sem movimentar bruscamente o tubo
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Não deixar o sangue em contato direto com gelo (quando necessário conservar a amostra a baixas temperaturas)
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Embalar e transportar o material de acordo com a Vigilância Sanitária local, instruções de uso do fabricante de tubos e do fabricante do teste diagnóstico a ser analisado
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Usar tubo primário e evitar a transferência de um tubo para outro
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Evitar expor o material coletado a temperaturas muito elevadas ou diretamente à luz, prevenindo hemólise e/ou degradação
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Não deixar o sangue armazenado refrigerando por muito tempo antes de fazer os exames
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Não centrifugar a amostra de sangue em tubo para obtenção de soro antes do término da retração do coágulo, pois pode levar à ruptura celular
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Ao utilizar um tubo primário com gel separador, a separação do soro deve ser efetuada entre 30 minutos e 2 horas após a coleta
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Não interromper abruptamente a centrifugação dos tubos
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ARMAZENAMENTO DE AMOSTRA
A estabilidade pré-analítica depende de vários fatores, incluindo temperatura, manuseio correto da amostra e tempo, sendo este o fator que causa maior impacto. O tempo máximo de estabilidade de uma amostra deve ser o que permite 95% de estabilidade de seus componentes.
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O tempo entre a coleta e centrifugação do sangue não deve exceder uma hora. Exames realizados com soro necessitam aguardar pelo menos 30 minutos em temperatura ambiente antes de armazenar em refrigeração, a fim de evitar a formação de fibrina.
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Amostras de sangue total colhidas com anticoagulante devem ser mantidas em temperatura de 2 a 8°C até o procedimento.
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Para alguns exames, como bilirrubina e dosagem de vitaminas, é necessário que o material biológico seja protegido da luz, por uso de frasco âmbar, papel alumínio ou carbono.
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Um acondicionamento inapropriado dos frascos pode resultar em deterioração do material biológico (impedindo a realização do exame), alterações no resultado, vazamento do material e rótulos molhados e ilegíveis.
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